Különbség A Halmozódó Gél és Az Elválasztó Gél Között

2024 Szerző: Mildred Bawerman | [email protected]. Utoljára módosítva: 2023-12-16 08:39

Fő különbség - gél halmozása vs elválasztó gél

Az SDS-PAGE technika magyarázatában a halmozó gél és az elválasztó gél kifejezéseket használjuk. Az SDS-PAGE vagy a nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid gél elektroforézis olyan laboratóriumi technika, amelyet a fehérjemolekulák molekulatömegük alapján történő szétválasztására használnak. A technika mögött az az elmélet áll, hogy a különböző molekulatömegű fehérjék eltérő migrációs sebességet mutatnak; az alacsony molekulatömegű molekulák gyorsabban, míg a nagy molekulatömegűek lassan. A migrációs közeg egy gél. Kétféle gél van, amelyeket egymásra rakódó gélnek és elválasztó gélnek neveznek. A legfontosabb különbség a halmozó gél és az elválasztó gél között az, hogy a rakó gél pH-ja 6,8, míg az elválasztó gél pH-ja 8,8.

TARTALOM

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség

2. Mi a gél felrakása

3. Mi a gél elválasztása

4. Kapcsolat a gél halmozódása és a gél elválasztása között

5. Egymás melletti összehasonlítás - Gél egymásra helyezése és elválasztó gél táblázatos formában

6. Összefoglalás

Mi a Stacking Gel?

A rakó gél egy alacsony koncentrációjú poliakrilamid gél, amelyet a koncentráltabb rezolváló gél (elválasztó gél) tetejére helyezünk SDS-PAGE technikával. A halmozó gélt az elektroforézis felbontásának javítására használják. A felbontás növekszik, mivel különbség van a halmozódó gél és a rezolváló gél koncentrációi között, amelyek hatással vannak a mintában lévő fehérjékre. Mivel a poliakrilamid koncentrációja a gélben alacsony, a pórusméret nagyobb. Ez szintén hozzájárul az elválasztás növeléséhez.

A rakó gél egy laza poliakrilamid gél, nagy pórusokkal, körülbelül 7% poliakrilamidból. Ezek a pórusok nem jelentenek jelentős akadályt a nagy fehérjemolekulák számára. Ezért ez a gél kissé befolyásolja a fehérjék mobilitását. Ez a fehérje mobilitása és nagysága szerint történő szétválasztást teszi lehetővé két gél közé koncentrálva.

01. ábra: SDS-PAGE akrilamid gél

A halmozó gél pH-ja 6,8. PH-ja savas, mint a gél 2 pH-egységgel történő felbontása. Ez a pH alacsonyabb ionerősséget, így nagyobb elektromos ellenállást jelent. Ez provokálja a fehérjék mobilitását, mint a gélben lévő más töltött részecskék.

Mi az elválasztó gél?

Az SDS-PAGEtechnika szétválasztó gélje vagy rezolváló gélje egy erősen koncentrált poliakrilamid gél, amelyet az alacsony koncentrációjú halmozó gél tetejére helyeznek. Az elválasztó gél nagy mennyiségű (10%) poliakrilamidot tartalmaz. Ennek a gélnek a pH-ját 8,8-ként tartják, ami magasabb pH-szint, mint a halmozó gél pH-jának.

02. ábra: Gélelektroforézis készülék

Amikor a fehérjemolekulák eljutnak a szétválasztó gélig, az említett molekulák migrációja lelassul, mert a szétválasztó gél nagy koncentrációjú, kis pórusméretű gél, amely jelentős gátaként szolgálhat a fehérjemolekulák mozgásában. Ez a lassulás lehetővé teszi, hogy a többi fehérje lassan vándoroljon, hogy felzárkózzon, ami keskeny, koncentrált sávot eredményez a két gél között.

Mi a kapcsolat a gél felrakása és a gél elválasztása között?

A Stacking Gel és az Separating Gel típusokat ugyanabban a készülékben használják

Mi a különbség a gél felrakása és az elválasztó gél között?

Különböző cikk a táblázat előtt

Halmozó gél vs elválasztó gél
A rakó gél egy alacsony koncentrációjú poliakrilamid gél, amelyet a koncentráltabb rezolváló gél (elválasztó gél) tetejére helyezünk SDS-PAGE technikával.	Az SDS-PAGE technikával elválasztó gél vagy rezolváló gél egy erősen koncentrált poliakrilamid gél, amelyet egy alacsony koncentrációjú halmozó gél tetejére helyezünk.
Elhelyezés
Halmozó gélt helyezünk a felbontó (elválasztó) gélre.	A gélelektroforézishez használt edény aljára elválasztó gélt helyezünk.
Koncentráció
A halmozódó gél koncentrációja magas.	Az elválasztó gél koncentrációja alacsony.
Poliakrilamid-tartalom
A gél kb. 7% poliakrilamidot tartalmaz.	Az elválasztó gél körülbelül 10% poliakrilamidot tartalmaz.
pH
A halmozó gél pH-ja 6,8.	Az elválasztó gél pH-ja 8,8.
Pórusméret
Nagy pórusméretek vannak jelen a halmozó gélben.	Az elválasztó gélben kis pórusméretek vannak jelen.
Felbontás
A halmozódó gél jobb felbontást biztosít.	A gél elválasztása gyenge felbontást eredményez.

Összegzés - gél halmozása vs elválasztó gél

A rakó gél és a szétválasztó gél kétféle poliakrilamid gél, amelyet a fehérjemolekulák jobb elválasztására használnak egy adott mintában. A rakásgél és az elválasztó gél közötti különbség az, hogy a rakó gél pH-ja 6,8, míg az elválasztó gél pH-ja 8,8.