Fő különbség - Nitrocellulóz vs Nylon membrán
A blotolás fontos módszer a DNS, RNS és fehérjék specifikus szekvenciájának kimutatására keverékeikből a molekuláris biológiában. A blot nevű membrán segítségével történik. Különböző blotolási technikák léteznek, például északi, déli és nyugati blotolás. A blotolási folyamathoz megfelelő membránt kell kiválasztani, hogy megakadályozzuk a nem specifikus kötődést és a hibás detektálást. A blotolási technikákban a nitrocellulóz, a nejlon és a PVDF általában membrán. Különböző tulajdonságokkal rendelkeznek. A legfontosabb különbség a nitrocellulóz és a nejlon membrán között az, hogy a nitrocellulóz membránok nagy fehérje immobilizációs potenciállal rendelkeznek, míg a nejlon membránok nagy nukleinsav immobilizációs potenciállal rendelkeznek. Mindkét típusú membránt azonban gyakran használják a blotolási technikákban.
TARTALOM
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a nitrocellulóz membrán
3. Mi a nejlon membrán
4. Egymás melletti összehasonlítás - nitrocellulóz és nejlon membrán
5. Összegzés
Mi az a nitrocellulóz membrán?
A nitrocellulóz membrán egy általánosan használt membránszűrő nukleinsav- és fehérje-blot technikákban. Magas fehérjekötő képességgel rendelkezik. Ezért a nitrocellulóz membránokat széles körben használják a western blot technikában. A nitrocellulóz membránok kompatibilisek az összes hibridizációs technikával, és interferencia nélkül kiváló kötődési képességet mutatnak. A nitrocellulóz membránok természetesen hidrofil természetűek. Hidrofil kölcsönhatásba lépnek a molekulákkal, és hatékonyan rögzítik őket a membránon. A kereskedelmi forgalomban kapható nitrocellulóz membránok két pórusméretben állnak rendelkezésre: 0,45 és 0,2 um.
01. ábra: Western-blotolásnál alkalmazott nitrocellulóz-membrán
Mi az a nylon membrán?
A nejlonmembrán egy másik típusú kereskedelmi membrán, amelyet blotolási technikákban használnak. Alternatív módon nitrocellulóz membránokkal együtt alkalmazzák a déli és északi blotoláshoz. A nylon membránok ideálisak a déli blotoláshoz, mint a nitrocellulóz, mivel a DNS-hez való kötődésük iránti nagy affinitásuk van. A nejlonmembránok számos egyedi tulajdonságának köszönhetően a kutatók általában nylonhártyákat használnak déli és északi blotoláshoz a nitrocellulóz membrán helyett. A nylon membránokat a sztrippeléshez és az újracsiszoláshoz is ajánlják, ellentétben a nitrocellulózzal.
02. ábra: A déli blotoláshoz használt nylon membrán
Mi a különbség a nitrocellulóz és a nylon membrán között?
Különböző cikk a táblázat előtt
Nitrocellulóz vs nylon membrán |
|
| A nitrocellulóz membránok törékenyek. | A nejlon membránok kevésbé törékenyek. |
| Kezelése | |
| Nehéz kezelni őket. | Könnyen kezelhetők. |
| Reprobing | |
| A nem támogatott nitrocellulóz membránokat nehéz újratölteni. | Nejlonmembránokkal könnyű újrapróbálni. |
| Kompatibilitás a különféle tárolási feltételekkel | |
| A nitrocellulóz membránok kevésbé szilárdak ahhoz, hogy ellenálljanak a különféle tárolási feltételeknek. | A nejlon membránok robusztusabban reagálnak a különféle tárolási körülményekre. |
| Használat | |
| Elővétel szükséges. | A nejlonmembránoknál az előrétegezés nem szükséges. |
| Hidrofil természet | |
| A nitrocellulóz membránok hidrofil természetűek, de kevésbé hidrofilek, mint a nejlon membránok. | Nagyon hidrofil természetűek. |
| Immobilizációs potenciál | |
| A nitrocellulóz membránok kisebb affinitással rendelkeznek a nukleinsavak iránt. De nagy affinitása van a fehérjékhez. | A nejlon membránok magas kötési potenciállal rendelkeznek a nukleinsavakkal szemben, mint a nitrocellulóz membránok. |
Összegzés - Nitrocellulóz vs Nylon membrán
A nitrocellulóz és a nejlon membránok speciális lapok, amelyeket a blot technikában használnak a gélen lévő sávosodás reprodukálásához. Lehetővé teszik egy adott szekvencia vagy fehérje kimutatását a keverékekből úgy, hogy a membránon rögzítik őket. Miután a molekulák immobilizálódtak, felhasználhatók szubsztrátként hibridizációs elemzéshez jelölt próbákkal. A nitrocellulóz membránt általában a fehérje kimutatására használják Western-blot technikában, mivel a fehérjékhez nagy kötődési affinitást mutat. A nejlon membránokat gyakran használják déli és északi blotoláshoz. Ez a különbség a nitrocellulóz és a nejlon membrán között.
