Fő különbség - Vízszintes és függőleges gélelektroforézis
A gélelektroforézis a genetikában alkalmazott laboratóriumi technika a DNS-t, RNS-t és más fehérjéket tartalmazó keverékek szétválasztására a töltésük és a molekulatömegük szerint. Az ebben a módszerben elválasztandó DNS-t, RNS-t vagy fehérjéket kis pórusokat tartalmazó gélen vezetjük át. A molekulákat elektromos tér hajtja át a gélen. A molekulák áthaladnak a gél pórusain, és a mozgás sebessége fordítottan arányos a megfelelő hosszukkal. Ezért az alacsonyabb molekulatömegű molekulák gyorsabban mozognak, mint a nagyobb molekulatömegűek. Az elektromos mezőt a gél két végén lévő töltéskülönbség generálja. Az egyik végén pozitív töltés, a másikban negatív töltés található. Mivel a DNS és RNS molekulák negatív töltésűek,vonzódni fognak a gél pozitív töltésű vége felé. A gélelektroforézis kétféle lehet: horizontális gélelektroforézis és vertikális gélelektroforézis. A vízszintes gélelektroforézis során a gél vízszintes helyzetben van, és folyamatosan futó pufferbe merül, amely magában a gélládában van. A függőleges gélelektroforézis során a pufferrendszer függőlegesen van orientálva, és nem folytonos a tetején és az alján található két kamrával, katóddal, illetve anóddal. Ez a legfontosabb különbség a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között.a gél vízszintes helyzetben van, és folyamatosan futó pufferbe merül, amely magában a géldobozban van. A függőleges gélelektroforézis során a pufferrendszer függőlegesen van orientálva, és nem folytonos a tetején és az alján található két kamrával, katóddal, illetve anóddal. Ez a legfontosabb különbség a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között.a gél vízszintes helyzetben van, és folyamatosan futó pufferbe merül, amely magában a gélládában van. A függőleges gélelektroforézis során a pufferrendszer függőlegesen van orientálva, és nem folytonos a tetején és az alján található két kamrával, katóddal, illetve anóddal. Ez a legfontosabb különbség a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között.
TARTALOM
1. Áttekintés és fő különbség
2. Mi a vízszintes gélelektroforézis
3. Mi a függőleges gélelektroforézis
4. A vízszintes és a függőleges gélelektroforézis hasonlóságai
5. Egymás melletti összehasonlítás - Vízszintes és függőleges gélelektroforézis táblázatos formában
6. Összefoglalás
Mi a vízszintes gélelektroforézis?
A vízszintes gélelektroforézis az alapelméletet használja a DNS-, RNS- vagy fehérjemolekulák szétválasztására a megfelelő molekulatömeg és töltés szerint. Ebben a technikában a gél vízszintes helyzetben van, és folyamatos pufferba merül. Agaróz gélt használnak a gél doboz két részre történő szétválasztására. A géldoboz egyik vége anódot, míg a másik vége katódot tartalmaz. Áram alkalmazásakor az ebben a technikában használt puffer lehetővé teszi egy töltésgradiens létrehozását. A feltöltéskor a gél hajlamos felmelegedni. A puffer hűtőfolyadékként is funkcionál, amely optimális szinten tartja a hőmérsékletet. A futó puffer visszakeringése megakadályozza a pH-gradiens kialakulását. Egy szakaszos pufferrendszer nem használható a vízszintes gélelektroforézisben, mivel a gélrendszer két rekesze összekapcsolódik a futó pufferrel. Az akrilamidot gélelektroforézis során használják a fehérje-keverékek elválasztására.
01. ábra: Vízszintes gélelektroforézis
A vízszintes gélelektroforézis során az akrilamid nem használható, mivel a gélládát oxigénnek tesszük ki. Az oxigén jelenléte miatt az akrilamid polimerizációja gátolt, és ez megzavarja a gél képződését. A vízszintes gélelektroforézis könnyedén alkalmazható módszer, amelyet a DNS és az RNS elválasztására használnak.
Mi a függőleges gélelektroforézis?
A vertikális gélelektroforézis technika a gélelektroforézis elsődleges elmélete szerint működik, de összetettebbnek tekinthető, mint a vízszintes gélelektroforézis módszere. Ez a technika egy szakaszos puffert használ. A felső kamrában egy katód, az alsó kamrában pedig az anód található. Az egyes rekeszekben található elektródák biztosítják a szükséges elektromos teret. A két felszerelt üveglap közé vékony réteg gélt öntünk. Ezért a gél felső része bemerül a felső kamrába, és a gél alsó része az alsó kamrába. Miután beindította az áramot, a puffer egy kis része az alsó kamrába mozog a felső kamrából a gélen keresztül. Az ebben a technikában alkalmazott áram percegységek.
02. ábra: Függőleges gélelektroforézis
A vertikális gélelektroforézis során a puffer csak a gélen folyik át. Ez lehetővé teszi a feszültséggradiens pontos szabályozását az elválasztási szakaszban. Akrilamid-gél felhasználható, mivel a rekeszeket nincs kitéve légköri oxigénnek. Az akrilamid-gél kisebb pórusmérete miatt nagyobb felbontással pontos elválasztás érhető el.
Milyen hasonlóságok vannak a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között?
- Mindkét rendszer a gélelektroforézis alapelméletének megfelelően működik.
- Az anódot és a katódot használják a szükséges elektromos tér biztosításához mindkét rendszerben.
Mi a különbség a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között?
Különböző cikk a táblázat előtt
Vízszintes és függőleges gélelektroforézis |
|
| A vízszintes gélelektroforézis olyan gélelektroforézis technika, amelyben a gél vízszintes helyzetben van jelen. | A vertikális gélelektroforézis olyan gélelektroforézis technika, amelyben a gél függőlegesen van orientálva. |
| Puffer | |
| A vízszintes gélelektroforézis folyamatos pufferből áll. | A függőleges gélelektroforézis során a futó puffer szakaszos. |
| Akrilamid alkalmazása | |
| Az akrilamid nem használható vízszintes gélelektroforézishez, mivel a gélládát légköri oxigénnek teszik ki. | Mivel a gélt két különálló kamra miatt nincs kitéve légköri oxigénnek, akrilamidot lehet használni függőleges gélelektroforézishez. |
| Funkció | |
| A vízszintes gélelektroforézist gyakrabban alkalmazzák a DNS és RNS keverékek szétválasztására, de a fehérjéket nem. | A fehérje keverékeinek elkülönítésére vertikális gélelektroforézist alkalmaznak. |
Összegzés - Vízszintes és függőleges gélelektroforézis
A gélelektroforézis olyan laboratóriumi technika, amelyet széles körben alkalmaznak a DNS, RNS és fehérjék molekuláit tartalmazó keverékek elválasztásában. A gélelektroforézisnek két módszere van: vízszintes és függőleges gélelektroforézis. A vízszintes gélelektroforézis során a futó puffer folyamatos, míg a függőleges gélelektroforézisnél nem folyamatos. Ez a különbség a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között. Mindkét rendszer a gélelektroforézis közös elve szerint működik.
A vízszintes és függőleges gélelektroforézis PDF verziójának letöltése
A cikk PDF-verzióját letöltheti, és offline célokra is használhatja, az idézési megjegyzés szerint. Kérjük, töltse le itt a PDF verziót. Különbség a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között.
