Fő különbség - Kapilláris elektroforézis vs gélelektroforézis
Az elektroforézis egy olyan technika, amelyet a biomolekulák szétválasztására használnak a részecsketöltet, a részecskeméret és a részecske alakja alapján. Az elektroforetikus mobilitás néven ismert molekula migrációja az alkalmazott polimer / gél típusától, pórusméretétől, a nyújtott feszültségtől, a futási időtől és a felület / térfogat arányától függ. Különböző típusú elektroforézis technikák léteznek az alkalmazott biomolekula típusától függően. Az első feltalált elektroforézis típus a papírelektroforézis volt, ahol nitrocellulóz papírt használtak közegként a biomolekulák elválasztására. A gélelektroforézis elvét, amikor különböző pórusméretű géleket alkalmaztak a biomolekulák elválasztására, később találták ki. A gélelektroforézis technikáját tovább módosítottuk a technika pontosságának javítása érdekében, és az egyik ilyen módosítás a kapilláris elektroforézis. A legfontosabb különbség a kapilláris elektroforézis és a gélelektroforézis között az, hogy a gélelektroforézist függőleges vagy vízszintes síkban hajtják végre, standard pórusméretű polimer gél alkalmazásával, míg a kapilláris elektroforézist kapilláris csőben, polimer folyadékkal vagy géllel végezzük.
TARTALOM
1. Áttekintés és legfontosabb különbség
2. Mi a gélelektroforézis
3. Mi a kapilláris elektroforézis
4. A kapilláris elektroforézis és a gélelektroforézis közötti hasonlóság
5. Egymás melletti összehasonlítás - kapilláris elektroforézis és a gélelektroforézis táblázatos formában
6. Összefoglalás
Mi a gélelektroforézis?
A gélelektroforézis olyan technika, amelyet főként nukleinsavak, fehérjék vagy aminosavak elválasztására használnak töltése, mérete és alakja alapján. Ez a technika elválasztó közegként egy fizikai gélt, amely egy polimer anyag. A leggyakrabban használt gélek az agaróz (nukleinsav-elválasztáshoz) és a poliakrilamid (a fehérje-elválasztáshoz). A gélelektroforetikus készülék tartalmazza a gél előkészítésére szolgáló gélöntőtálcát, öntőfésűket a kutak előkészítéséhez, puffertartályt, pozitív (anód) és negatív (katód) elektródákat és a feszültségellátó egységet. A negatív töltésű molekulák, mint például a DNS vagy az RNS, a katódról az anódra, a pozitív töltésű molekulák pedig fordítva mozognak. A gél előkészítése a követelményeknek megfelelően történik. Ha nagy felbontásra vagy molekulák elválasztására van szükség,nagy koncentrációjú, kisebb pórusméretű gélt kell készíteni. A gélmátrixon elválasztott molekulákat festési technika után figyeljük meg. Az elválasztott molekulák sávokként jelennek meg a gélmátrixon.
01. ábra: Gélelektroforézis
A gélelektroforézist olyan molekuláris diagnosztikában alkalmazzák, mint például a DNS-ujjlenyomatok, hogy meghatározzák egy adott DNS / RNS-fragmens vagy fehérje jelenlétét. A gélelektroforézis meghatározza az extrahált biomolekulaminta tisztaságát is. A gélelektroforézist a hibridizáció és a hibridizáció előzetes lépéseként, valamint a szekvenálás után megerősítő elemzésként hajtjuk végre.
Mi a kapilláris elektroforézis?
A kapilláris elektroforézis a gélelektroforézis olyan módosítása, amely ugyanazt az elválasztási elvet alkalmazza a töltés, a molekula mérete alapján, de egy kapilláris csőben vagy gél anyaggal, vagy folyékony polimerrel hajtja végre. A kapillárisok olvasztott szilícium-dioxidból készülnek, és mindegyik kapilláriscső belső átmérője 50-100μm és hossza 25-100cm. A mintákat a polimer anyagot tartalmazó kapilláris csőbe injektáljuk, és a hagyományos gélelektroforézishez képest nagyon gyorsan elválasztjuk. A kapilláris rendszer jól védett egy szigetelő köpeny belsejében, amely megvédi a mintát az esetleges szennyeződéstől. A kapillárisokat meg lehet tölteni folyékony polimerekkel, például hidroxi-etil-cellulózzal vagy nagy felbontású gélekkel, például poliakrilamiddal. A kapilláris elektroforézis nagyobb felbontást biztosít; ennélfogva az elválasztás pontosabb. A kapilláris elektroforézis automatizált detektorrendszert alkalmaz spektrofotometriás elemzésen keresztül. Ennek oka a nagyobb felület / térfogat arány.
02. ábra: Kapilláris elektroforézis
A kapilláris elektroforézist olyan helyzetekben alkalmazzák, mint például a kriminalisztika, ahol nagyobb pontosságra van szükség, és nem gyakran használják, mivel költséges technika.
Milyen hasonlóságok vannak a kapilláris elektroforézis és a gélelektroforézis között?
- A molekulák szétválasztása mindkét technikában a molekula töltésén és méretén alapul.
- Mindkét technika alkalmazható mind a nukleinsavak, mind a fehérjék elválasztására.
- Mindkét technika mintatérfogata megegyezik.
- Mindkét technika puffert használ az elválasztás megkönnyítésére.
Mi a különbség a kapilláris elektroforézis és a gélelektroforézis között?
Különböző cikk a táblázat előtt
Kapilláris elektroforézis vs gél elektroforézis |
|
| A kapilláris elektroforézis olyan technika, amely folyékony vagy géles polimer közeggel elválasztja a biomolekulákat egy kapilláris csövön. | A gélelektroforézis olyan technika, amely egy biomolekulát függőleges vagy vízszintes síkban választ el polimer gélközeg alkalmazásával. |
| Elválasztás | |
| A kapilláris elektroforézis során az elválasztást egy kapilláris csőben végezzük. | A gélelektroforézis során az elválasztást függőleges vagy vízszintes síkon végezzük. |
| Közepes elválasztás | |
| Folyékony polimereket, például hidroxi-etil-cellulózt használnak a kapilláris elektroforézis során. | A géleket, akár agarózt, akár poliakrilamidot, közegként alkalmazzuk a gélelektroforézis során. |
| Keresztkötés | |
| Nagy felbontást kapilláris elektroforézissel lehet elérni. | A felbontás alacsony a gélelektroforézisben. |
| Felület / térfogat arány | |
| A felület / térfogat arány magas a kapilláris elektroforézisben. | A felület / térfogat arány alacsony a gélelektroforézisben. |
| Detektálási technika | |
| A detektálást automatizált spektrofotometriás detektorokkal végzik kapilláris elektroforézis során. | A festést és az UV transzilluminátorral történő megfigyelést detektálási technikaként végezzük a gélelektroforézis során. |
Összegzés - Kapilláris elektroforézis vs gélelektroforézis
A molekuláris diagnosztika nagy szerepet játszik a tudományos világban. A DNS, az RNS és a fehérjék azonosítása és tisztítása a diagnosztikai eljárások kritikus lépése. Az elektroforézis egy olyan technika, amely elválasztja és azonosítja a biomolekulákat mind a gélelektroforézisben, mind a sokkal fejlettebb kapilláris gélelektroforézisben. A gélelektroforézist függőleges vagy vízszintes síkban hajtjuk végre, standard pórusméretű polimer gél alkalmazásával, míg a kapilláris elektroforézist kapilláris csőben, polimer folyadék vagy gél segítségével. Ez a különbség a kapilláris elektroforézis és a gél elektroforézis között. Az elektroforézis technika befejezése után a biomolekulákat hibridizációval vagy olyan technikákkal, mint például az ujjlenyomatok tovább feldolgozzák, hogy magasabb szintű információt nyerjenek.
A kapilláris elektroforézis és a gél elektroforézis PDF verziójának letöltése
A cikk PDF-verzióját letöltheti, és offline célokra is használhatja, az idézési megjegyzés szerint. Kérjük, töltse le itt a PDF verziót. Különbség a gélelektroforézis és a kapilláris elektroforézis között.
