Fő különbség - immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia
A molekuláris biológiai módszereket alkalmazó betegségdiagnosztika a klinikai laboratóriumi technológia egyik új területévé vált. Ez magában foglal minden vizsgálatot és módszert a betegség azonosítására és a betegség okának megértésére a szervezetben lévő DNS, RNS vagy expresszált fehérjék elemzésével. A molekuláris diagnosztika gyors fejlődése lehetővé tette a fertőző és nem fertőző betegségek alapkutatását. Ezeket a betegségben szerepet játszó kulcsfontosságú gének vagy fehérjék szekvenciájának vagy expressziójának változásának meghatározására használják. Az immunfluoreszcencia (IF) és az immunhisztokémia (IHC) két ilyen széles körben alkalmazott technika a rákbiológiában. Az IF az IHC egy olyan típusa, ahol fluoreszcencia detektálási módszert alkalmaznak a monoklonális és poliklonális antitestek elemzésére, míg az IHC kémiai alapú módszereket alkalmaz a monoklonális és poliklonális antitestek kimutatására. Ez a legfontosabb különbség az IF és az IHC között.
TARTALOM
1. Áttekintés és kulcsfontosságú különbség
2. Mi az immunfluoreszcencia
3. Mi az immunhisztokémia
4. Az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia közötti hasonlóság
5. Egymás melletti összehasonlítás - immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia táblázatos formában
6. Összefoglalás
Mi az immunfluoreszcencia (IF)?
Az immunfluoreszcencia egy detektálási technika, ahol a vizsgálatban használt antitesteket fluoreszcens festékekkel vagy fluoreszcens fehérjékkel jelölik a kimutatás céljából. A jelölt másodlagos antitestek nem kívánt háttérjeleket eredményezhetnek; ezért az IF technika jelenleg az elsődleges antitest jelölésére épül, hogy elkerüljék a nem kívánt jeleket a detektálás során. Ezzel a technikával megakadályozzák a primer és a szekunder antitest közötti nem specifikus kötődést, és gyorsabb, mivel nincs benne másodlagos inkubációs lépés. Javul az adatminőség is.
01. ábra: Kettős immunfluoreszcens festés BrdU, NeuN és GFAP esetében
A fluorokrómok vagy a fluoreszcens festékek olyan vegyületek, amelyek képesek elnyelni a sugárzást, előnyösen az ultraibolya sugárzást, amely gerjesztett. Amikor a részecskék gerjesztett állapotból eljutnak az alapállapotba, sugárzást bocsátanak ki, amelyet egy detektor megfog és spektrumot alkot. Nagyon fontos, hogy a fluoreszcens jelölés kompatibilis és stabil legyen az adott reakcióhoz, és a pontos eredmények elérése érdekében megfelelően konjugálni kell az antitesttel. Az egyik leggyakrabban alkalmazott fluorokróm a fluoreszcein-izotiocianát (FITC), amely zöld színű, abszorpciós és emissziós csúcsa hullámhossza 490 nm, illetve 520 nm. A rodamin, az IF-ben alkalmazott másik szer vörös színű, és abszorpciós és emissziós csúcsa hullámhossza 553 nm és 627 nm.
Mi az immunhisztokémia (IHC)?
Az IHC egy molekuláris vizsgálati módszer, amelyet az antigén jelenlétének a célsejtben való azonosítása és megerősítése céljából alkalmaznak. A célsejt lehet fertőző részecske, mikrobiális kórokozó vagy rosszindulatú daganatos sejt. Az IHC monoklonális és poliklonális antitesteket alkalmaz a célsejtek sejtfelszínén jelenlévő antigének jelenlétének meghatározására. A technika antigén-antitest megkötésen alapul. Egy detektáló marker konjugálódik ezekhez az antitestekhez az adott antigén jelenlétének vagy hiányának kimutatása céljából. Ezek a markerek lehetnek kémiai markerek, például enzimek, fluoreszcensen jelölt antitestek vagy rádióval jelölt antitestek.
02. ábra: Egér-agy szelet festett immunhisztokémiai módszerrel
Az IHC legnépszerűbb alkalmazása a rákos sejtbiológiában a rosszindulatú daganatok jelenlétének azonosítására, de fertőző betegségek kimutatására is alkalmazzák.
Milyen hasonlóságok vannak az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között?
- Az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia in vitro körülmények között zajlik.
- Mindkét technika az antigén-antitesten alapul
- Mindkettő nagyon gyors technika.
- A technikák eredményei megismételhetők.
- Mindkettő javította az adatminőséget.
- Ezeket a technikákat használják a rák és a fertőző betegségek diagnosztikájában.
Mi a különbség az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között?
Különböző cikk a táblázat előtt
Immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia |
|
| Az IF olyan detektálási technika, ahol a vizsgálatban használt antitesteket fluoreszcens festékekkel vagy fluoreszcens fehérjékkel jelölik a detektáláshoz. | Az IHC egy detektálási technika, ahol a vizsgálatban használt antitesteket vegyi anyagokkal vagy radioaktív elemekkel jelölik a detektáláshoz. |
| Pontosság | |
| A pontosság nagyobb az IF technikájában, mint az IHC. | A pontosság alacsonyabb az IHC-ben. |
| Sajátosság | |
| IF konkrétabb. | Az IHC kevésbé specifikus. |
Összegzés - immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia
A molekuláris mechanizmusok számos változást hoztak az orvostudomány területén, amelyek olyan fejlett molekuláris vizsgálati módszereket eredményeztek, amelyek forradalmat hoztak a diagnosztika területén. Ezek a találmányok a betegség gyors és pontos azonosításához és megerősítéséhez vezettek, ezáltal lehetővé téve a gyógyszerek sikeres beadását és előállítását. Ezeket a technikákat a farmakológiában is használják a gyógyszerek célpontjának felkutatása és a gyógyszer farmakokinetikai tulajdonságainak a gyógyszer metabolizmusa során történő megerősítése érdekében. Az IF és az IHC két diagnosztikai módszer, amelyek az antigén és az antitest megkötésének koncepcióján alapulnak, bár a kimutatás módja mindkét technikában eltér. Az IF a fluoreszcencia elvét használja az antigén kimutatására, az IHC pedig a kémiai konjugáció fogalmát használja az antigén kimutatására. Ez a különbség az IF és az IHC között.
Az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia PDF verziójának letöltése
A cikk PDF-verzióját letöltheti, és offline célokra is használhatja, az idézési megjegyzés szerint. Kérjük, töltse le itt a PDF verziót. Különbség az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között.
