Fő különbség - átmeneti és stabil transzfekció
A transzfekció olyan folyamat, amely kémiai vagy fizikai módszerekkel részt vesz az eukarióta sejtek géntranszferjében. A transzfekció két fő típusba sorolható: tranziens transzfekció és stabil transzfekció. Átmeneti transzfekció során az érdeklődő gén nem integrálódik a gazda genomjába, és rövid időre expresszálódik a gazdán belül, míg stabil transzfekció esetén az érdekelt gén integrálódik a gazda genomjába, és több generációban hosszú ideig fennmarad.. Ez a legfontosabb különbség a tranziens és a stabil transzfekció között. Mindkét esetben a transzfekció sikeres, és a gének expresszálódnak.
TARTALOM
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi az átmeneti transzfekció
3. Mi a stabil transzfekció
4. Egymás mellett történő összehasonlítás - átmeneti és stabil transzfekció
5. Összegzés
Mi az átmeneti transzfekció?
A transzfekció fontos eszköz a gének eukarióta sejtekbe történő beillesztésére. A transzfekció két típusa közül az átmeneti transzfekció a génátadás általános módja. Egy vektor révén az idegen gének transzformálódnak a gazdasejtekben. Amint az idegen DNS bejut a gazdasejtbe, két lehetősége van. Vagy integrálódhat a gazda genomjába és szaporodhat, vagy bent maradhat anélkül, hogy integrálódna a genomba. Az átmeneti transzfekció a beillesztett gének ideiglenes expresszióját mutatja be, anélkül, hogy beilleszkedne a gazda genomjába. A gének a sejt megosztásáig expresszálják és termelik a kódolt fehérjét. Az integráció képtelensége miatt azonban nem képes megismételni és bekerülni a következő generációkba. Ez a fajta transzfekció rövid ideig sikeres. A sejtosztódás során vagy más tényezők miatt az idegen DNS lebomlik. Az átmeneti transzfekció akkor mutatkozik meg, amikor az idegen DNS erősen tekercselt DNS formájában van.
01. ábra: Átmeneti transzfekció
Mi a stabil transzfekció?
A stabil transzfekció sikeres idegen génintegrációt mutat a gazda genomjába. Amint az idegen DNS belép a gazdasejtbe, az idegen DNS egy része integrálódik a gazda genomjába, és annak részévé válik. Ezért az idegen DNS akkor is replikálódik és átjut a jövő nemzedékeibe, amikor a gazda genom megismétlődik. Ez a fajta transzfekció összetett és ritka. A genomba történő stabil transzfekció miatt azonban ez a tulajdonság több generáción át hosszabb ideig fennmarad.
A stabil transzfekció nehéz folyamat, és megköveteli a DNS hatékony szállítását és az idegen DNS sejtjeinek megszerzését a genomjába. Ezért a lineáris DNS kedvez a stabil transzfekciónak, mint a körkörös DNS. Azonban, stabil transzfekció aránya körülbelül egy 10 4 transzformált sejtekben. A stabil transzfekció megfigyelhető egy szelektálható marker kotranszfomációjával és a mesterséges szelekcióval egy táptalajon.
02. ábra: Stabil transzfekció
Mi a különbség az átmeneti és a stabil transzfekció között?
Különböző cikk a táblázat előtt
Átmeneti és stabil transzfekció |
|
| Az idegen DNS nem integrálódik a gazda genomjába. | Az idegen DNS integrálódik a gazda genomjába, és annak részévé válik. |
| Replikáció a gazdagépen belül | |
| Az átmenetileg transzfektált gének nem replikálódnak a gazdaszervezeten belül. Ezért a gének nem kerülnek át a következő generációkra. | A gének a gazdaszervezeten belül reprodukálódnak, és továbbadódnak a jövő generációinak. |
| A génexpresszió időtartama | |
| A gének véges ideig expresszálódnak, és ezt követően megsemmisülnek. | A gének a genom részévé válnak, és a generáción belül hosszú ideig kifejeződnek. |
| Használat | |
| Ez hasznos a gének vagy géntermékek rövid távú expressziójának hatásainak tanulmányozásához. | Ez hasznos a génexpresszió hosszú távú hatásainak tanulmányozásához. |
| A transzfekció detektálása | |
| A gének expresszálódnak, és riportergén beépítésével könnyen kimutathatók. | A stabil transzfekció könnyen detektálható egy szelektálható marker behelyezésével és a táptalajon történő mesterséges szelekcióval történő szelekcióval. |
| Előfordulás és folyamat | |
| Az átmeneti transzfekció gyakori, és végrehajtása nem bonyolult. | A stabil transzfekció ritkán fordul elő, és végrehajtása bonyolult. |
| A DNS jellege | |
| Az erősen szupertekercselt DNS alkalmas tranziens transzfekcióra. | A lineáris DNS alkalmas a stabil transzfekcióra. |
| Alkalmazások | |
| Ezt a gén leütésének vagy a gátló RNS-ekkel történő elnémítás, a fehérjetermelés kis léptékű tanulmányozására használják | Ezt használják fehérjetermelésre nagyszabású, hosszabb távú farmakológiai vizsgálatokban, génterápiában, a hosszú távú genetikai szabályozás mechanizmusainak kutatásában |
Összegzés - átmeneti és stabil transzfekció
Az átmeneti és stabil transzfekciók a transzfekciók két típusát mutatják be, amikor a gén nem virális alapú rendszerek révén eukarióta sejtekbe kerül. A transzformált idegen DNS átmeneti transzfekcióban nem integrálódik a gazda genomjába, míg a stabil transzfekció során integrálódik a gazda genomjába. A körkörösen tekercselt DNS tranziens transzfekciót mutat, míg a lineáris DNS a stabil transzfekciót részesíti előnyben. Ez a különbség a tranziens és a stabil transzfekció között. Az átmeneti transzfekció azonban gyakoribb és egyszerűbb, mint a stabil transzfekció. De a kettő közül egy kiválasztása a génátadás céljától és a kutatási projekt időtartamától függ.
