Különbség A Közvetlen és Indirekt ELISA Között

2024 Szerző: Mildred Bawerman | [email protected]. Utoljára módosítva: 2023-12-16 08:39

Kulcskülönbség - Közvetlen vagy közvetett ELISA

Az enzimhez kapcsolt immunvizsgálat (ELISA), más néven enzim immunvizsgálat, egy szerológiai teszt, amely kimutatja a vérben lévő antitesteket. Diagnosztikai eszközként használják annak kiderítésére, hogy a páciens egy bizonyos típusú vírusnak vagy más fertőző ágensnek (antigénnek) volt-e kitéve, és a szervezet termelt-e antitesteket a fertőzés ellen. Az ELISA a múltbeli és a jelenlegi fertőzéseket is képes azonosítani. Ezért az ELISA-t gyakran használják előzetes szűrővizsgálatként az orvosok a betegségek mélyreható elemzése előtt. Ezt a vizsgálatot a laboratóriumban úgy lehet elvégezni, hogy vérmintát vesznek a betegtől. Az ELISA tesztnek két típusa van: közvetlen ELISA és közvetett ELISA. A közvetlen és a közvetett ELISA közötti legfontosabb különbség az, hogy a közvetett ELISA érzékenyebb és szekunder antitest hozzáadását igényli, míg a közvetlen ELISA kevésbé érzékeny és csak primer antitestet használ.

TARTALOM

1. Áttekintés és kulcsfontosságú különbségek

2. Mi a közvetlen ELISA

3. Mi az indirekt ELISA

4. Egymás melletti összehasonlítás - Közvetlen vagy közvetett ELISA

5. Összegzés

Mi a közvetlen ELISA?

Az ELISA egy betegség diagnosztikai teszt, amelyet bizonyos antigének vagy antitestek vérben való jelenlétének azonosítására végeznek. Tányérvizsgálatként végezzük. Könnyen meghatározható enzimekhez kapcsolt antitesteket használ. Az antigének jelenléte a szérummintában specifikus, enzimekhez kapcsolt antitestekkel kötődik. Az utolsó lépésben egy specifikus szubsztrátot adunk hozzá, hogy reagáljon az enzimmel. Az enzim átalakítja a szubsztrátot színes vagy szignáltermelő termékké. A kémiai szubsztrát színváltozása egy adott antitest jelenlétét tárja fel a szérum mintában. A közvetlen ELISA teszt csak az enzimhez kapcsolt primer antitestet használ. Az antigénhez kötődve gyorsan megváltoztatja a színét, jelezve a fertőző ágens jelenlétét a vérben. Azonban,a jelek intenzitása gyengébb a közvetlen ELISA-ban, mivel az epitópok az antigének megkötésére korlátozódnak. Ezért a közvetlen ELISA kevésbé érzékeny a közvetett ELISA-hoz képest.

01. ábra: Közvetlen ELISA teszt

Mi az a közvetett ELISA?

Az ELISA-t kétféle antitest alkalmazásával hajthatjuk végre, nevezetesen; primer antitest és szekunder antitest. Az indirekt ELISA eszköz mindkét típusú antitestet használja a jelek amplifikálására a jobb detektálás érdekében. Az indirekt ELISA technikát az alábbiak szerint hajtjuk végre.

1. A lemezeket antigénekkel inkubáljuk, és mossuk, hogy blokkoljuk a nem specifikus kötődést.
2. Ezután primer antitesteket adunk hozzá és mossuk.
3. Enzimhez kapcsolt szekunder antitestet adunk hozzá és mossuk.
4. Szubsztrátot adunk hozzá, és hagyjuk reagálni az enzimekkel.
5. Jeleket detektálunk, és azonosítjuk a mintában lévő specifikus antigén jelenlétét vagy hiányát.

Közvetett ELISA-tesztben több másodlagos antitest is képes megkötni egyetlen primer antitestet. A másodlagos antitestek könnyen meghatározható enzimekhez kapcsolódnak. Ezért egy kötés egynél több interakció miatt erős jelet adhat. Ezért a közvetett ELISA érzékenyebb, mint a közvetlen ELISA. A közvetett ELISA azonban nem specifikus jeleket képes előállítani a szekunder antitestek keresztreakciói miatt.

02. ábra: Indirekt ELISA teszt

Mi a különbség a közvetlen és az indirekt ELISA között?

Különböző cikk a táblázat előtt

Közvetlen vagy közvetett ELISA
A közvetlen ELISA kevésbé érzékeny a közvetett ELISA-hoz képest.	A közvetett ELISA érzékenyebb.
Eltelt idő
A közvetlen ELISA teszt gyors folyamat.	A közvetett ELISA időigényes.
Antitestek használata
A közvetlen ELISA-ban csak egy típusú antitestet (primer antitesteket) használnak.	A közvetett ELISA-hoz primer és szekunder antitesteket használnak.
Kapcsolat az enzimekkel
Az elsődleges antitestek enzimekhez kapcsolódnak.	A másodlagos antitestek kapcsolódnak az enzimekhez.
A második antitestek keresztreaktivitása
A közvetlen ELISA kiküszöböli a második antitestek keresztreakcióját.	A közvetett ELISA-t a második antitestek keresztreakciója befolyásolja.
Jelek
A jelek gyengék a közvetett ELISA-hoz képest.	A jeleket közvetett ELISA-val erősítik. Ezért könnyen felismerhető.

Összegzés - Közvetlen vagy közvetett ELISA

Az ELISA egy biokémiai technika, amelyet főleg az immunológiában alkalmaznak antitest vagy antigén jelenlétének kimutatására a beteg vérmintájában. Két, közvetlen vagy közvetett ELISA néven ismert eljárással hajtható végre. A közvetlen ELISA-teszt csak primer antitesteket használ az antigén kimutatására, míg a közvetett ELISA primer és szekunder antitesteket egyaránt használ. A közvetlen ELISA-ban az elsődleges antitesteket, míg a közvetett ELISA-ban a szekunder antitesteket jelölik. Ez a különbség a közvetlen és a közvetett ELISA között.