Kulcskülönbség - YAC vs BAC vektorok
A molekulákat a vektorok használják a molekuláris klónozásban. A vektort úgy definiálhatjuk, mint egy DNS-molekulát, amely hordozóként viselkedik, hogy idegen genetikai anyagot vigyen egy másik sejtbe. Az idegen DNS-t tartalmazó vektor rekombináns DNS néven ismert, és képesnek kell lennie a gazdaszervezeten belüli replikációjára és expresszálására. Az élesztő mesterséges kromoszóma (YAC) és a bakteriális mesterséges kromoszóma (BAC) a klónozásban részt vevő kétféle vektor. A fő különbség a YAC és a BAC között az, hogy a YAC egy mesterségesen felépített vektorrendszer, amely az élesztő kromoszóma egy meghatározott régióját használja, hogy az élesztősejtekbe genetikai anyagok nagy szegmenseit illessze be, míg a BAC egy mesterségesen felépített vektorrendszer, amely az E. coli kromoszóma egy meghatározott régióját használja. nagy DNS-szegmensek beillesztésére az E. coli sejtekbe.
TARTALOM
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mik a YAC vektorok
3. Mik a BAC vektorok
4. Egymás melletti összehasonlítás - YAC vs BAC vektorok
5. Összegzés
Mik a YAC vektorok?
A YAC (élesztő mesterséges kromoszóma) egy mesterségesen felépített kromoszóma, amely képes az idegen DNS nagy szegmensének hordozására és az élesztősejtekben történő replikációra. Van centromere, telomerjei, valamint autonóm módon replikáló szekvenciái, amelyek elengedhetetlenek a replikációhoz és a stabilitáshoz. A YAC-nak szelektív markert vagy markereket és restrikciós helyeket is tartalmaznia kell, hogy hatékony klónozó vektor legyen. Az 1000 kb-tól 2000 kb-ig terjedő nagy szekvencia beilleszthető a YAC-ba és átvihető az élesztőbe. A YAC transzformációs hatékonysága nagyon alacsony.
01. ábra: YAC vektor
Mik azok a BAC vektorok?
A bakteriális mesterséges kromoszóma (BAC) egy mesterségesen felépített kromoszóma a molekuláris klónozáshoz. Az E. coli F plazmid specifikus régióival rendelkezik, kör alakú és szuper tekercselt. A BAC-t úgy fejlesztették ki, hogy a DNS-fragmenseket baktériumokra, különösen E. coli-ra klónozza. Legfeljebb 300 kb méretű DNS-fragmenseket képes hordozni. A YAC-hoz képest a BAC klónozó betétek kisebb méretűek. A BAC-kat 1992-ben fejlesztették ki, és stabilitása és könnyű felépítése miatt még mindig népszerű. A BAC-k vakcinák kifejlesztésében is hasznosak.
02. ábra: BAC vektor molekuláris klónozásban
Mi a különbség a YAC és a BAC vektorok között?
Különböző cikk a táblázat előtt
YAC vs BAC vektorok |
|
| A YAC egy géntechnológiával módosított kromoszóma, élesztő DNS-t használnak klónozás céljából. | A BAC egy géntechnológiával módosított DNS-molekula, amely E. coli DNS-t használ klónozás céljából. |
| Nem | |
| A YAC-kat úgy tervezték, hogy a genomi DNS nagy fragmentumait élesztőbe klónozzák. | BAC-kat fejlesztettek ki a nagy genomi fragmentumok Escherichia coli-ba történő klónozásához. |
| Beszúrás hossza | |
| A YAC-k megabázis méretű genomi betéteket tartalmazhatnak (1000 kb - 2000 kb). | A BAC-k 200–300 kb vagy kisebb méretű betéteket képesek hordozni. |
| Építkezés | |
| A YAC DNS-t nehéz épen megtisztítani, és nagy koncentrációt igényel a YAC vektorrendszer előállításához. | A BAC épségben könnyen tisztítható és könnyen elkészíthető. |
| Kiméra | |
| A YAC-k gyakran kimerák. | A BAC ritkán kiméra. |
| Stabilitás | |
| A YAC instabil. | A BAC stabil. |
| Módosítások | |
| Az élesztő rekombinációja nagyon megvalósítható és mindig aktív marad. Ezért törléseket és egyéb átrendeződéseket generálhat a YAC-ban. | Az E. coli rekombinációt megakadályozzák, és szükség esetén bekapcsolják. Így csökkenti a BAC-ok nem kívánt átrendeződését. |
| Karbantartás | |
| A rekombináns YAC-k manipulálása általában megköveteli, hogy a YAC-t E. coli-ba vigyék át későbbi manipuláció céljából. Ezért munkaigényes folyamat. | A BAC módosítása közvetlenül az E. coliban történik. Tehát nincs szükség DNS-transzferre. Ezért a folyamat nem fáradságos. |
Összegzés - YAC vs BAC vektorok
A YAC a klónozási folyamatok alapvető kutatási eszközévé vált, mivel képes nagy DNS-fragmenseket klónozni a gazdaszervezetbe. A YAC-knak azonban számos hátrányuk van, mint például vektorok, például konstrukciós nehézségek, kiméra, instabilitás stb. Ezért a problémák leküzdésére a tudósok kifejlesztettek BAC vektorokat. A BAC-t az E. coli kromoszóma specifikus régióinak felhasználásával állítottuk össze. Ez egy stabil vektor és könnyen konstruálható. A BAC által kezelt DNS hossza azonban akár 20-szor kisebb, mint a YAC-nak. Ez a különbség a YAC és a BAC vektor rendszerek között. Manapság a BAC a laboratóriumokban előnyösebb a YAC helyett.
